ICS 11.220 CCS B 41 泰 DB3212 州 市 地 方 标 准 DB3212/T 2035—2022 鹅星状病毒病综合防控技术规范 2022-05-10发布 2022-05-10实施 泰州市市场监督管理局 发 布 DB3212/T 2035—2022 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由江苏农牧科技职业学院提出。 本文件由泰州市农业农村局归口。 本文件起草单位：江苏农牧科技职业学院、国家水禽基因库（江苏）。 本文件主要起草人：吴植、王安平、谢军、吴双、朱善元、王健、孙国波、袁敬知、纪荣超、吕海 玲。 I DB3212/T 2035—2022 鹅星状病毒病综合防控技术规范 1 范围 本文件规定了鹅星状病毒病诊断、预防和控制措施。 本文件适用于泰州市内的鹅场星状病毒病的诊断、预防和控制。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 13078 饲料卫生标准 GB 18596 畜禽养殖业污染物排放标准 NY/T 682 畜禽场场区设计技术规范 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 NY 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质 NY/T 5038 无公害食品 家禽养殖生产管理规范 NY/T 5339 无公害农产品 畜禽防疫准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鹅星状病毒病 goose astrovirus disease 又称“鹅痛风”，是由鹅星状病毒引起的一种以雏鹅的肾脏、心包和肝脏等内脏器官及关节出现大 量尿酸盐沉积为主要特征的急性传染病。鹅星状病毒分为鹅星状病毒 1 型和鹅星状病毒 2 型。 4 诊断 4.1 流行病学 主要感染雏鹅，以 5 日龄~ 20 日龄的雏鹅最为易感，日龄越小，发病率和死亡率越高，最高分别 可达 80 %和 50 %。病鹅、隐性带毒鹅、带毒种蛋是主要传染源。传播途径以消化道为主。本病的发生 无明显季节性，一年四季均可发生，常呈地方流行性。 4.2 临床症状 本病病程持续 3 d ~ 7 d，发病初期会出现精神不振，羽毛松乱，行动迟缓，排灰白色水样粪便， 消瘦但食欲相对正常；发病后期食欲减退至废绝，关节肿大，跛行，卧地不起，不愿走动，部分病鹅出 现单脚站立或呈现蹲姿，喙和蹼呈苍白色，最终衰竭死亡。 4.3 病理变化 本病可引起雏鹅体内多种组织器官发生病变，剖检可见心包和肝脏表面被大量白色尿酸盐沉积覆 盖，肝脏淤血肿大，心包和气囊有碎渣样尿酸盐渗出物，肾脏肿大、色泽变淡、表面沉积白色斑块状尿 酸盐，输尿管内可见大量白色渗出物。部分病死鹅的颈部皮下、腿部肌肉及关节腔中出现尿酸盐沉积。 病理组织学变化主要表现为肾小管上皮细胞坏死、间质出血，肾小球肿胀，脾脏有大量红细胞浸润，肝 细胞空泡变性、尿酸盐沉积。 4.4 分子生物学诊断 1 DB3212/T 2035—2022 4.4.1 病料采集与处理 采集疑似鹅星状病毒感染死亡鹅的肝脏、脾脏和肾脏等组织样品。采集病料时，用无菌手术剪取组 织样品，置于样品保存管中，密封、编号；活禽泄殖腔/喉拭子样品，置于样品保存管中；所有样品应 置于密闭容器中冷藏运输，保存温度在-15 ℃以下，时间不超过 24 h。按 RNA 提取试剂盒提取 RNA，提 取的 RNA 应立即检测，否则应置于-70 ℃冻存备用。 4.4.2 双重实时荧光定量 PCR 检测 4.4.2.1 引物及探针的设计 4.4.2.1.1 鹅星状病毒 1 型引物及探针的设计 ——上游引物 F：5’- CTGGTTTCGCTGAGACTCCT - 3’； ——下游引物 R：5’- GGCCCAACTTCTGGTAGCTT - 3’； ——探针 P：5’FAM- ACGCAGTGGAGTGTTATGCCTACCAG -BHQ3’ 4.4.2.1.2 鹅星状病毒 2 型引物及探针的设计 ——上游引物 F：5’- GCGAGTATCTAGGCTCATTGG - 3’； ——下游引物 R：5’- ATGATGGTTGGACAGGAAAAA - 3’； ——探针 P：5’FAM- VIC-TTTTTGTAGAGACGGACTGGACGCGTTAT-BHQ3’ 4.4.2.2 反应体系与反应条件 双重荧光定量 PCR 反应体系 25 μL：2Premix Ex Taq（Probe qPCR）12.5 μL，50ROX Reference Dye 0.4 μL， DNA 模板 1 μL，上、下游引物（1.0 pmol/μL each）各 0.4 μL，探针（1.0 pmol/μL each） 为 0.3 μL，灭菌超纯水补足 25 μL。反应条件：95℃ 30s，95℃ 5s，60℃ 31s；40 个循环。 4.4.2.3 PCR 检测结果的判定 当阳性对照样品 GAstV1 和 GAstV2 均出现典型的 S 型扩增曲线，空白对照样品和阴性对照样品均无 扩增曲线出现，本次实验结果有效。若 Ct 值小于或等于 35，且具有典型 S 型扩增曲线则判定为检测阳 性；若 Ct 值大于 35，或无典型 S 型扩增曲线则判定为检测阴性。 4.5 结果判断 4.5.1 4.5.2 5 符合 4.1、4.2 和 4.3 的，临床诊断为疑似鹅星状病毒病。 符合结果判定 4.5.1，且符合 4.4.2 时，可确诊为鹅星状病毒病。 预防 5.1 环境控制 鹅的饲养场所选址、布局及设施要求应符合《动物防疫条件审查办法》和 NY/T 682 的要求。 5.2 引种检疫 按照 NY/T 5339 的要求。 5.3 饲养管理 5.3.1 根据不同饲养方式和生长阶段鹅的饲养要求，合理安排饲养密度，应符合 NY/T 5038 的要求。 5.3.2 生产用水水源，应取用符合卫生标准的自来水厂水、井水，饮用水水质应符合 NY 5027 要求。 5.3.3 根据鹅的不同生长阶段的营养需求配置饲料，饲料应无霉变、无杂质，应符合 GB 13078 的要求， 防止营养过剩导致的营养性痛风和碳酸钙成分过多导致的钙盐性痛风。 5.4 5.4.1 2 生物安全管理 全进全出饲养 DB3212/T 2035—2022 舍养或放养，鹅清空后，空舍或者空场两周以上，可饲养下一批新鹅。非流动的活动水域应全部更 换新水或进行有效消毒后，可饲养下一批新鹅。 5.4.2 消毒 5.4.2.1 空舍消毒 已经清场空舍的，对墙裙、地面、笼具等非易燃物品用火焰喷射器进行火焰消毒，对水泥地面和墙 壁可用 2% 氢氧化喷洒消毒，笼具等工具及屋顶可用过氧乙酸、碘制剂等进行清洗消毒。清洗消毒 2 次 ~ 3 次，每次间隔 24 h。清洗消毒后，再用甲醛密闭熏蒸消毒 24 h 以上。 5.4.2.2 带鹅消毒 选用 0.2% ~ 0.3%的过氧乙酸进行带鹅喷雾消毒，消毒时间宜选择在有阳光、相对温暖的中午时分。 平时预防一周消毒 1 次~2 次，发病时可 2 d~3 d 消毒 1 次。 5.4.2.3 鹅舍用具消毒 使用无腐蚀性、无刺激性消毒剂定期对食槽、饲料车、饮水器等进行消毒。 5.4.2.4 人员消毒 人员进入鹅场或生产区，必须经过洗澡、更衣和紫外线消毒。 5.4.2.5 车辆工具消毒 进入生产区的车辆用腐蚀性小的消毒药进行喷洒消毒，车辆通过装有有效消毒液的消毒池进入。日 常生产过程中常用工具应定期采用日晒、消毒液喷洒或浸泡等方式进行消毒。 5.5 预防接种 针对该病，市场暂无合格可供疫苗使用。该病未发生时，可饲喂提高鹅机体免疫力的药物等。 6 控制 6.1 隔离患病鹅群 在确诊鹅星状病毒病后，应立即将未出现症状的鹅群隔离出饲养场地，放于清洁无污染场地饲养， 对患病的鹅群由单独人员进行隔离饲养，饲养人员进出饲养场地是要注意换衣换鞋，避免交叉感染。 6.2 全场紧急消毒 对于可能接触的用具、设备、鹅舍、道路及其它建筑进行彻底的消毒清洗，尽可能地消灭或隔离苍 蝇、蚊虫等传播媒介，用具需要天天清洗消毒。 6.3 紧急预防治疗 本病可用合适的高免血清或高免卵黄抗体进行紧急预防接种。 6.4 无害化处理 病死鹅按照《病死动物无害化处理技术规范》（农医发〔2013〕34 号）规定采取深埋或焚烧方式 进行无害化处理。对粪便及其它被污染物品，按 NY/T 1168 进行无害化处理。按 GB 18596 畜禽养殖业 污染物排放标准的要求处理。 6.5 疫情暴发流行处理 当暴发流行时，依照《中华人民共和国动物防疫法》进行处理。 3 DB3212/T 2035—2022 参 考 文 献 [1] 《中华人民共和国动物防疫法》 [2] 《动物防疫条件审查办法》 (农业部令 2010 年第 7 号) [3] 《病死动物无害化处理技术规范》（农医发〔2013〕34 号） ━━━━━━━━━━━ 4