ICS 65.020.30 B 40 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB 51/ T 1286—2019 代替 DB 51/T 1286—2011 规模化鸡场消毒技术规范 2019 - 12 - 30 发布 四川省市场监督管理局 2020 - 02 - 01 实施 发 布 DB51/ T 1286—2019 目 次 前言 ................................................................................. I 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 消毒剂种类 ........................................................................ 1 5 消毒剂的筛选 ...................................................................... 1 6 消毒程序及注意事项 ................................................................ 2 7 消毒效果检查 ...................................................................... 2 附录 A （资料性附录） 鸡场常用消毒剂种类 ............................................ 4 I DB51/ T 1286—2019 前 言 本标准依据GB/T 1.1－2009给出的规定进行编写。 本标准由四川省农业农村厅提出并归口。 本标准由四川省市场监督管理局批准。 本标准起草单位：四川大学。 本标准起草人：王红宁、雷昌伟、张安云、杨鑫、唐艺芝、孟延发、曾凡亚。 本标准代替DB 51/T 1286—2011 《规模化（蛋鸡、种鸡、商品肉鸡）鸡场消毒技术规范》，与DB 51/T 1286—2011相比，主要变化如下： ——修改了消毒剂的种类； ——修改了消毒程序和注意事项； ——修改了消毒效果检查； ——修改了附录A、附录B、附录C、附录D。 本标准自发布之日起，原四川省地方标准DB51/T 1286—2011 《规模化（蛋鸡、种鸡、商品肉鸡） 鸡场消毒技术规范》废止。 II DB51/ T 1286—2019 规模化鸡场消毒技术规范 1 范围 本标准规定了规模化鸡场的消毒剂种类、消毒剂筛选、消毒程序及注意事项、消毒效果检查等。 本标准适用于四川省行政范围内规模化鸡场消毒技术指导。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T 388 畜禽场环境质量标准 病死及病害动物无害化处理技术规范 农医发〔2017〕25号 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 消毒 杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到无害化要求，从而阻止和控制传染病的发生。消毒方法通常 包括化学和物理方法。 3.2 消毒剂 用于杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到无害化要求的制剂。 4 消毒剂种类 包括季铵盐类、卤素类、过氧化剂类、醛类、碱类、醇类、酸类等消毒剂，其有效成分、适用范围 等详见附录A。 5 消毒剂的筛选 5.1 最小抑菌浓度的测定 采用倍比稀释法测定最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）。将消毒剂用灭 菌生理盐水分别按1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280、1∶2560倍数稀 释，可根据消毒剂的建议使用浓度，增加或减少稀释倍数。取每种稀释度的消毒剂溶液2mL与等量的双 8 倍浓度的营养肉汤混合，分别取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌悬液（菌含量为10 CFU/mL） 1 DB51/ T 1286—2019 0.1mL，接种于各试管中，每个稀释度做3个重复，37℃48 h后观察抑菌效果，如有细菌生长，可见肉汤 混浊，有的可见菌膜或菌环，无细菌生长时，肉汤清晰透明，能抑制细菌生长繁殖的消毒剂的最高稀释 倍数为此消毒剂对试验菌的MIC。 5.2 最小杀菌浓度的测定 将消毒剂用灭菌生理盐水分别按1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280、 1∶2560倍数稀释，可根据消毒剂的建议使用浓度，增加或减少稀释倍数。取每种稀释度消毒剂溶液2ml 8 与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌悬液（菌含量为10 CFU/mL）0.1mL，作用1分钟后取出0.1mL 的样本接种于含中和剂的营养肉汤，每个稀释度做3个重复，37℃ 48h后观察结果。判定标准：以无菌 生长的最高稀释倍数作为该消毒剂在该时间内对试验菌的最小杀菌浓度（ minimum bactericidal concentration，MBC）。 5.3 消毒剂的筛选原则 选用MIC、MBC最低，成本最低，无显著急性或慢性毒副作用，无三致作用，对环境无显著不良影响 的消毒剂作为生产上使用的消毒剂。有条件的鸡场可从本场鸡舍内分离培养金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 蜡样芽孢杆菌，测定MIC和MBC，筛选有效消毒剂。 6 消毒程序及注意事项 6.1 规模化鸡场消毒程序 规模化鸡场消毒程序见附录B。带鸡消毒推荐使用的消毒剂为癸甲溴铵 （百毒杀）、戊二醛 （新 大卫）、次氯酸、月苄三甲氯铵（安立消）、苯扎氯铵（拜洁）、酸性电解水，其中夏季和冬季推荐带 鸡消毒程序见附录C。 6.2 消毒剂使用注意事项 6.2.1 每次带鸡消毒时应关闭门窗和风机，消毒 5 分钟后再打开。 6.2.2 消毒剂应结合鸡场常见疫病流行情况选择不同的消毒剂每个季节轮换使用，避免产生耐药性。 6.2.3 消毒剂应现配现用，消毒剂混合使用时应注意配伍禁忌，以免降低消毒效果。 6.2.4 每个季节开展消毒剂消毒效果监测，依据实际的消毒效果来选择消毒药物。 6.2.5 鸡舍配备温度计，喷雾消毒过程中，关闭风机的同时检测室内温度，室温达到 30℃时应及时打 开风机。 7 消毒效果检查 7.1 检查指标 用物品表面总菌数降低的百分率评价消毒效果，以消毒后总菌数下降90%为合格；用空气中总菌数 3 评价消毒效果，按照NY/T 388规定鸡舍中的空气总菌数不超过25 000CFU/m 为合格。 7.2 检查方法 7.2.1 物品表面检查 2 在消毒物品相邻部位划出2个10cm 范围，消毒前后分别以无菌棉签（生理盐水蘸湿）采样，均匀涂 布于普通营养琼脂平板上， 37℃培养箱中培养48 h计算总菌数。 2 DB51/ T 1286—2019 7.2.2 空气总菌数检测 使用空气微生物采样器采集空气中的微生物。采样点距地面 60 cm使用空气微生物采样器采样1 min，采样器配置标准的 9 cm直径的普通营养琼脂平板。 7.2.2.1 半封闭式规模化鸡舍的空气总菌数检测方法 在鸡舍内选取中央料线长度的中点，在鸡舍内取对角线上与另两条料线相交的4点共5点作为测试 点，见附录D。将采样后的琼脂平板放入37℃培养箱中培养48 h。 按以下公式计算菌落总数： C1/C2/C3/C4/C5=(N1+N2+N3+N4+N5+N6)×1000/(V×T) C=(C1+C2+C3+C4+C5)/5 3 公式中，C1、C2、C3、C4、C5：分别代表五个采样点的每立方米菌落数(CFU/m )；C：鸡舍每立方米 3 菌落总数(CFU/m )；N1、N2、N3、N4、N5、N6：采样点所对应的1-6级平皿菌落数(个)；V：空气微生物采 样器采样速率(L/min)；T：空气微生物采样器采样时间(min)。 7.2.2.2 全封闭式规模化鸡舍的空气总菌数检测方法 全封闭式规模化鸡场空气细菌采样点位于鸡舍内部空气细菌数量的最大值（位于鸡舍横向3/4位置， 纵向1/2位置）及其前后5m位置作为采样点，共计3个测试点，见附录D。将采样后的琼脂平板放入37℃ 培养箱中培养48 h。 按以下公式计算菌落总数： C1/C2/C3 =(N1+N2+N3+N4+N5+N6)×1000/(V×T) C=(C1+C2+C3)/3 3 公式中，C1、C2、C3：分别代表3个采样点的每立方米菌落数(CFU/m )；C：鸡舍每立方米菌落总数 3 (CFU/m )；N1、N2、N3、N4、N5、N6：采样点所对应的1-6级平皿菌落数(个)；V：空气微生物采样器采样 速率(L/min)；T：空气微生物采样器采样时间(min)。 3 DB51/ T 1286—2019 AA 附 录 A （资料性附录） 鸡场常用消毒剂种类 消毒剂种类 季铵盐类消毒剂 有效成分 适用范围 优缺点 苯扎溴铵、癸甲溴铵、 用于带鸡喷雾消毒、鸡舍用 无毒性、无刺激性、气味小、无腐蚀性、 苯扎氯铵等 性质稳定，可有效杀灭细菌、有囊膜病 具、水槽、食槽及饮水消毒 毒和一些真菌 卤素类消毒剂 过氧化剂类消毒剂 次氯酸钠、碘伏、碘 主要用于鸡体、车辆、鸡舍环 对细菌、病毒和真菌的杀灭效果较好， 酊等 境消毒 但对芽孢的效果较差 过氧化氢、过氧乙酸、 过氧乙酸用于鸡体、鸡舍地面 具有广谱、高效、无残留、强氧化能力， 二氧化氯和臭氧等 能杀灭细菌、真菌、病毒等特点 和用具消毒，也可用于密闭鸡 舍、用具和种蛋的熏蒸消毒 醛类消毒剂 碱类消毒剂 戊二醛等 氢氧化钠、生石灰等 戊二醛主要用于带鸡喷雾消 具有高效力的杀菌、杀病毒、杀真菌和 毒 杀芽孢作用 适用于墙面、地面通道，消毒 对病毒、细菌的杀灭作用较强，高浓度 池、贮粪场、污水池等的消毒 溶液可杀灭芽胞，但有一定的刺激性及 腐蚀性 醇类消毒剂 酸类消毒剂 乙醇和异丙醇等 醋酸、硼酸、乳酸、 用于皮肤、工具、设备、容器 属于中效消毒剂，可杀灭细菌繁殖体， 的消毒 破坏多数亲脂性病毒 常用于空气