(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210811171.7 (22)申请日 2022.07.11 (71)申请人 中南大学 地址 410083 湖南省长 沙市岳麓区麓山 南 路932号 (72)发明人 谢建平　王国祯　 (74)专利代理 机构 成都方圆聿联专利代理事务 所(普通合伙) 51241 专利代理师 张淑枝 (51)Int.Cl. G01N 21/31(2006.01) G01N 21/01(2006.01) (54)发明名称 一种用于分光光度法检测茶多酚和抗坏血 酸的纳米材 料 (57)摘要 本发明公开了一种用于分光光度法检测茶 多酚和抗坏血酸的纳米材料， 属于化学分析领 域。 该纳米材料由如下方法制得： 首先利用微生 物质作为吸附剂吸附钯离子溶液中的钯离子， 其 次使用孔径0.22μm或0.45μm滤膜分离吸附钯 离子的微生物质， 随后向悬浮有微生物质的去离 子水中逐滴加入还原剂进行还原， 清洗后得到钯 纳米材料。 制得的纳米材料用于分光光度法检测 茶多酚和抗坏血酸浓度， 稳定性好， 操作简单， 无 需借助高效液相色谱等复杂仪器， 减少了滴定 法 肉眼确定反应终点的误差 。 权利要求书2页 说明书3页 附图3页 CN 115184287 A 2022.10.14 CN 115184287 A 1.一种用于分光 光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材 料的制备 方法， 包括： (1)使用微 生物质作为吸附剂， 在钯离 子溶液中进行吸附； (2)使用孔径0.2 2 μm或0.45 μm滤膜将吸附钯离 子的微生物质固液分离； (3)将分离得到的微生物质重新悬浮于去离子水中， 并逐滴加入还原剂进行还原， 还原 反应在摇床中进行， 清洗后得到一种用于分光 光度法检测茶多酚和抗坏血酸的纳米材 料。 2.根据权利要求1所述的制备 方法， 其中： 步骤(1)所述吸附剂包括： 微 生物菌体、 微 生物菌渣、 改性 微生物； 所述钯离 子溶液浓度为10 0～1000mg/L， 体积为10～10 00mL； 所述吸附剂的用量 为1～10g/L； 所述吸附条件为： 转速10 0～300rpm， 温度10～5 0℃， 时间3～12h 。 3.根据权利要求2所述的制备 方法， 其中： 所述钯离 子溶液浓度为5 00mg/L， 体积为10 0mL； 所述吸附剂的用量 为1g/L； 所述吸附条件为： 转速180rpm， 温度3 0℃， 时间6 h。 4.根据权利要求1所述的制备 方法， 其中： 步骤(3)所述还原剂包括： 甲酸钠、 乙酸钠、 硼氢化钠； 所述去离 子水的体积为10～10 00mL； 所述还原剂终浓度为1～10 0mmol/L。 5.根据权利要求 4所述的制备 方法， 其中： 所述去离 子水体积为10 0mL； 所述还原剂为终浓度为20m mol/L的甲酸钠。 6.一种根据权利要求1～5所述任一制备方法制得的用于分光光度法检测茶多酚和抗 坏血酸的纳米材 料。 7.一种根据权利要求6所述的纳米材 料在茶多酚和抗坏血酸检测中的应用， 包括： (1)将1mg纳米材料加入到含有3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺的pH为3.5 ‑5的乙酸钠 ‑乙酸 缓冲溶液中， 反应体系 体积为2800 μL， 避光反应0.1 ‑1h后， 分别加 入200 μL已知浓度梯度的 茶多酚或抗坏血酸溶液， 使用紫外 ‑可见光分光光度计测试652nm下吸光度， 以茶多酚或抗 坏血酸浓度的吸光度值做标准曲线； (2)取含茶多酚或抗坏血酸的样品溶液加入到含有3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺的乙酸 钠‑乙酸缓冲溶液中， 避光反应0.1 ‑1h后， 使用紫外 ‑可见光分光光度计测试652nm下吸光 度， 3,3',5,5' ‑四甲基联苯胺浓度、 乙酸钠 ‑乙酸缓冲溶液pH及反应时间同步骤(1)中建立 标准曲线反应 体系， 根据上述标准曲线可 得到待测样品中茶多酚或抗坏血酸浓度。 8.根据权利要求7 所述的应用， 其中： 步骤(1)所述3,3' ,5,5'‑四甲基联 苯胺终浓度为10m mol/L、 体积为3 0～2000 μL； 所述已知浓度梯度的茶多酚和抗坏血酸浓度范围为0.1～3 00 μmol/L。 9.根据权利要求8所述的应用， 其中： 所述TMB体积为15 00 μL。 10.根据权利要求7 所述的应用， 其中：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115184287 A 2步骤(1)所述乙酸钠 ‑乙酸缓冲溶 液pH为4.0， 体积为13 00 μL； 所述避光反应时间为0.5 h。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115184287 A 3