(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210677769.1 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 辽宁中医药大学 地址 110847 辽宁省沈阳市皇姑区崇山 东 路79号 (72)发明人 英锡相　刘佩山　徐纹　姚俊杰　 张宏哲　 (74)专利代理 机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 专利代理师 史力伏 (51)Int.Cl. C07D 217/08(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A23L 33/105(2016.01) (54)发明名称 马齿苋中一种新型异喹啉类生物碱及其提 取分离方法 (57)摘要 本发明涉及中药提取、 分离领域， 尤其涉及 从 马 齿 苋 中 提 取 、分 离 和 鉴 别 出 的 oleraisoquinoline及其提取分离方法。 所述 的 新化合物 ， 分子式为C1 6H1 6N2O3， 命名为 oleraisoquinoline。 还提供上述新化合物的提 取分离方法， 依次采用乙醇回流提取、 硅胶柱层 析、 SI正相硅胶 中压柱层析、 Sephadex  LH‑20及 HPLC进行分离 纯化与制备， 成功的分离得到该新 化合物。 其结构采用1H‑NMR、13C‑NMR及二维核磁 波谱解析的方法确定为oleraisoquinoline。 该 化合物具有潜在的抗炎和抗癌活性， 并提供制备 方法， 为开发新药和开发新 成分提供先导物和理 论依据。 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 CN 114989083 A 2022.09.02 CN 114989083 A 1.从马齿苋药材中分离出的oleraisoquinoline， 其特征在于， 所述化合物的分子式 为 ： C1 6H1 6N2O3， 并且根据结构命名为1 ‑benzyl ‑2‑nitroso ‑1 ,2 ,3 ,4 ‑ tetrahydroisoquinoline‑6,7‑diol， 其化学结构式如下： 。 2.一种如权利要求1所述的新化合物的提取分离方法， 其特征在于， 提取分离方法的具 体步骤为： 步骤1： 取马齿苋干燥药材， 采用乙醇回流提取两次， 醇提液过滤， 合并滤液直接加热浓 缩， 放凉至室温， 得 药液备用； 步骤2： 将步骤1中的药液蒸干后上硅胶柱， 用乙酸乙酯洗脱， 减压回收乙酸乙酯至浸 膏， 得到乙酸乙酯提取物； 步骤3： 将步骤2中所得物再经SI正相硅胶中压柱进行层析分离， 用乙酸乙酯、 乙酸乙酯 ∶ 甲醇、 甲醇进行洗脱， 得到若干洗脱部位， 经薄层色谱进行检测、 显色， 将各显色的洗脱部 位分别减压浓 缩至干， 得到浓 缩物备用； 步骤4： 将步骤3中所得物再经预处理的SI正相硅胶中压柱进行层析分离， 用环己烷∶ 乙 酸乙酯， 乙酸乙酯， 乙酸乙酯∶ 甲醇梯度洗脱， 得到若干洗脱部位， 经薄层色谱进 行检测及显 色， 将各显色的洗脱部位分别减压浓 缩至干， 得到浓 缩物备用； 步骤5： 将步骤4中所得物再经预处理的葡聚糖凝胶柱层析分离， 用甲醇洗脱， 得到若干 洗脱部位， 经薄层色谱进行检测， 显色， 合并显色的洗脱部位， 将合并后的洗脱部位经减压 浓缩至干， 备用； 步骤6： 将步骤5中所得物再经预处理的SI正相硅胶中压柱进行层析分离， 用环己烷∶ 乙 酸乙酯， 乙酸乙酯， 乙酸乙酯∶ 甲醇梯度洗脱， 得到若干洗脱部位， 经薄层色谱进 行检测及显 色， 将各显色的洗脱部位分别减压浓 缩至干， 得到浓 缩物备用； 步骤7： 将步骤6中的浓缩物通过HPLC分离制备， 以甲醇∶0.1%甲酸水为流动相进行等度 洗脱， 最终得到 本发明所述的新 化合物。 3.如权利要求2所述提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤1中50%乙醇回流提取两次， 每次2小时， 5 0%乙醇用量 为药材的10倍。 4.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤2中所用流动相洗脱程序 为等度洗脱。 5.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤3中的SI正相硅胶层析分离用 乙酸乙酯、 体积比为5∶1和1∶1的乙酸乙酯： 甲醇、 甲醇进行梯度洗脱； 加压， 使流速为1mL/ min， 温度为室温， 其中填料 粒度为40 μm。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114989083 A 26.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤4中的SI正相硅胶层析分离用 体积比为5∶1和1∶1的环己烷： 乙酸乙酯、 乙酸乙酯、 体积比为5∶1乙酸乙酯∶ 甲醇、 甲醇进行 梯度洗脱； 加压， 使流速为1mL/mi n， 温度为室温， 其中填料 粒度为40 μm。 7.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤5中的Sephadex  LH‑20凝胶的 预处理过程为甲醇浸泡过2 4小时， 上柱， 以初始 流动相平衡， 所用流动相洗脱程序为等度洗 脱。 8.如权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 所述步骤6中的SI正相硅胶层析分 离用体积比为5∶ 1和1∶ 1的环己烷∶ 乙酸乙酯、 乙酸乙酯、 体积比为5∶ 1和1∶ 1乙酸乙酯∶ 甲醇、 甲醇进行梯度洗脱； 加压， 使流速为1mL/mi n， 温度为室温， 其中填料 粒度为40 μm。 9.如权利 要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤7中所用甲醇∶0.1%甲酸等度洗 脱中甲醇和水的体积比为70∶ 3 0。 10.一种如权利要求1所述的oleraisoquinoline的用途， 其特征在于， 所述用途可用于 制备抗炎药物或保健品。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114989083 A 3