(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210677809.2 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 复旦大学附属金山医院 （上海市金 山区眼病防治所、 上海市金山区核 化伤害应急救治中心） 地址 201508 上海市金山区龙航路15 08号 (72)发明人 蒋淼　王亚洁　李文俊　李正阳　 许石赞　华倩　 (74)专利代理 机构 上海卓阳知识产权代理事务 所(普通合伙) 31262 专利代理师 周春洪 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种结直肠癌诊断试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种结直肠癌诊断试剂盒及其 应用， 本发明通过体内及体外实验首次发现， FIRRE的过表达在结直肠癌中发挥着促进肿瘤进 展的作用。 FIRRE和P TBP1之间的直接相互作用导 致PTBP1蛋白从细胞核到细胞质的移位。 细胞质 中的FIRRE和PTBP1复合物结合BECN1mRNA， 增强 BECN1mRNA的稳定性。 FIRRE、 PTBP1、 BECN1三者的 相互作用影响自噬， 从而促进了结直肠癌的进 展。 此基础研究可为临床治疗结直肠癌提供新的 思路， 可针对FIRRE/PTBP1/BECN1轴设计靶基因 的药物用于治疗 结直肠癌， 为研究基因治疗提供 新的方向。 权利要求书1页 说明书7页 附图8页 CN 114934119 A 2022.08.23 CN 114934119 A 1.诊断标志 物FIRRE在制备 结直肠癌诊断试剂盒中的应用。 2.一种结直肠癌诊断试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括检测FIRRE表达量的试剂， 所述试剂作为试剂盒实现诊断结直肠癌的唯一关键成分。 3.一种评估结直肠癌预后的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 检测FIR RE表达量。 4.FIRRE在制备防治结直肠癌的药物中的应用。 5.FIRRE的抑制剂在制备防治结直肠癌的药物中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述FIRRE的抑制剂是降低FIRRE表达量的 物质。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述FIRRE的抑制剂选自小分子化合物或 生物大分子 。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述生物大分子是以FIRRE蛋白或其转录 本为靶序列、 且能够抑制FIRRE蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、 dsRNA、 shRNA、 微小RNA、 反义核酸； 或能表达或形成所述小干扰RNA、 dsRNA、 微小RNA、 反义核酸的构建物。 9.FIRRE‑PTBP1‑BECN1的抑制剂在制备防治结直肠癌的药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述的FIRRE ‑PTBP1‑BECN1的抑制剂是阻 止FIRRE‑PTBP1‑BECN1三者结合的物质。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114934119 A 2一种结直肠癌诊断试剂盒及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技 术领域， 具体地说， 是一种结直肠癌诊断试剂盒及其应用。 背景技术 [0002]结直肠癌是全球肿瘤发病率中排名第三， 每年因结直肠癌死亡的人数高达53200 人。 结直肠癌的高死亡率和有限的治疗选择使得进一步研究CRC的调控机制具有重要意义， 寻找可用于诊断和治疗结直肠癌的生物标志 物非常有必要。 [0003]结直肠癌的发生发展伴随多种编码基因和非编码基因的改变。 LncRNAs作为非编 码基因的一种， 参与了结直肠癌中的发生发展进程。 与蛋白结合后发挥相应的功能是 lncRNAs 重要的作用方式之一。 LncRNAs与蛋白相互结合后， 以多种作用机制广泛参与肿瘤 的生理病理进程中。 FIRRE是一种定位于X染色体上的保守lncRNA， 我们的研究发现FIRRE在 结直肠癌中的表达升高。 然而， 关于FI RRE在结直肠癌中的确切功能和分子机制的研究目前 尚未见报道。 [0004]多聚嘧啶序列结合蛋白(Polypyrimidine  tract‑binding protein， PTBP1， 也被 称为hnRNP I)， 是异构 核核糖核蛋白家族(h eterogeneous  nuclear ribonucleop roteins， hnRNPs)的重要成员， 在结直肠肿瘤中表达升高， 且和不良的预后相关。 PTBP1作为RNA结合 蛋白， 可以与lncRNA结合相互作用， 调控 各种生物学过程。 但是FIRRE和PTBP1之间的关系以 及两者在结直肠癌中的作用及机制仍然未有研究。 [0005]我们的研究揭示了FIRRE的过表达在结直肠癌中发挥着促进肿瘤进展的作用。 FIRRE 和PTBP1之间的直接相互作用导致PTBP1蛋白从细胞核到细胞质的移位。 细胞质中的   FIRRE和PTBP1复合物结合BECN1  mRNA， 增强BECN1  mRNA的稳定性。 FIRRE、 PTBP1、  BECN1三 者的相互作用影 响自噬， 从而促进了结直肠癌的进展。 FIRRE ‑PTBP1‑BECN1这一通路对 结直 肠癌发生发展影响以及潜在的临床应用价值还没有报道过， 我们首次提出  lncRNAFI RRE可 能作为诊断结直肠癌的生物标志 物以及作为结直肠癌治疗的一个新的作用靶点。 [0006]中国专利申请： CN113416781A公开了一种结直肠癌诊断标志物及其应用， 该结直 肠癌诊断标志物 为血清脂肪因子leptin  rs780093和/或rs900400， 该标致物在制备结直肠 癌检测试剂中的应用以及 含有该标志物的试剂盒， 本发 明筛选的脂肪因子lept in与血液中 结直肠癌诊断高度相关， 对于早期的结直肠癌样本的针对性很强， 利用该生物标记物以及 相应的监测技术开展结直肠癌的无创早筛早诊意义重大。 中国专利申请： CN107447033B公 开了一种结直肠癌诊断生物标志物及其应用， 首次发现了hsa_circ_0006110基因表达与结 直肠癌密切相关， 通过检测受试者结直肠组织中hsa_circ_0006110的表达， 可以断更加准 确、 快速的判断受试者是否已患有结直肠癌或是否存在患有结直肠癌的风险， 从而给临床 医师提供预防或治疗方案。 并且作为制备治疗结直肠癌药物的靶基因为治疗结直肠癌提供 了新的治疗靶点和治疗途径， 与传统的检测手段相比， 分子标志物的诊断更及时、 更特异， 从而提高结直肠癌患者的5年生存率， 降低死亡率， 应用前景广阔。 但是关于本发明一种结 直肠癌诊断试剂盒及其应用目前还未 见报道。说　明　书 1/7 页 3 CN 114934119 A 3