(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210688588.9 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 浙江大学医学院附属第一医院 地址 310000 浙江省杭州市余杭区文一西 路1367号 (72)发明人 王杭祥　应康康　 (74)专利代理 机构 杭州知闲专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 33315 专利代理师 黄燕 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61K 31/4745(2006.01) A61K 47/24(2006.01) A61K 47/28(2006.01)A61K 47/59(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种细胞膜包被的前药纳米粒、 制备方法及 应用 (57)摘要 本发明公开了一种细胞膜包被的前药纳米 粒， 包括： 由脂质单分子层和装载于所述脂质单 分子层中的SN38前药组成的SN38前药脂质 纳米 粒以及包裹在纳米粒外面的细胞膜； 所述的脂质 单分子层由卵磷脂、 胆固醇和DDAB/DOTAP作为骨 架， 同时以DSPE ‑PEG2k双亲性聚合物作为添加 剂。 本发明同时提供了一种上述细胞膜包被的前 药纳米粒的制备方法及应用。 本发 明的这种仿生 纳米载药平台表现出活性药物的酯酶响应性释 放， 显著延长了药物的体内循环时间， 提高了药 物的生物利用度， 增强了药物的抗肿瘤生长的效 果。 本发明提供的仿生纳米载药平台为小分子化 疗药物提供了广阔的临床转化前景， 也为肿瘤治 疗提供的新的选择方案 。 权利要求书1页 说明书8页 附图11页 CN 115089561 A 2022.09.23 CN 115089561 A 1.一种细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 包括： 由脂质单分子层和装载于所述脂 质单分子层中的SN38前 药组成的SN38前 药脂质纳米粒以及包裹在 纳米粒外面的细胞膜； 所述的脂质单分子层由卵磷脂、 胆固醇和DDAB/DOTAP作为骨架， 同时以DSPE ‑PEG2k双亲 性聚合物作为添加剂； 所述的SN38前 药的结构如下： 2.根据权利要求1所述的细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 所述细胞膜包被的前 药脂质纳米粒为球形形貌， 粒径 为50‑800nm； 所述SN38前药脂质纳米粒为球形形貌， 粒径为 50‑600nm。 3.根据权利 要求1所述的细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 以SN38计， 载药量为2 ～15％。 4.根据权利要求1所述的细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 卵磷脂、 胆固醇、 DDAB/DOTAP和D SPE‑PEG2k质量比为10～ 20:1.5～3.5:1:3～5 。 5.根据权利要求1所述的细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 所述细胞膜为M1型巨 噬细胞膜。 6.根据权利要求1所述的细胞膜包被的前药纳米粒， 其特征在于， 所述细胞膜采用LPS 刺激小鼠单核/巨噬细胞系获得的细胞膜。 7.一种如权利要求1至6任一项所述的SN38前药脂质纳米粒和细胞膜包被的SN38前药 纳米粒在制备抗肿瘤药物中的应用。 8.一种SN38前 药纳米粒的制备 方法， 其特 征在于： 将卵磷脂、 胆固醇、 DDAB/DOTAP和DSPE ‑PEG2k的脂质混合物溶于有机溶剂I中， 再将溶于 有机溶剂II的PCL ‑SN38前药与以上脂质混合物混合后， 通过纳米沉淀法得到均匀分散的 SN38前药脂质纳米粒。 9.根据权利要求8所述的SN38前药纳米粒的制备方法， 其特征在于： 所述的有机溶剂I 为乙醇， 所述有机溶剂I I为丙酮。 10.一种如权利要求1～6任一项所述的细胞膜包被的前药脂质纳米粒的制备方法， 其 特征在于， 将分离提取的细胞膜与SN38前药脂质纳米粒充分混合， 将混合物用挤出器通过 聚碳酸酯薄膜挤压， 制备细胞膜包被的SN38前 药脂质纳米粒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115089561 A 2一种细胞膜包被的前 药纳米粒、 制备方 法及应用 技术领域 [0001]本发明属于药物研发技术领域， 具体是涉及一种细胞膜包被的前药纳米粒、 制 备 方法及应用。 背景技术 [0002]最近， mRNA脂质纳米颗粒在开发创新的严重急性呼吸综合征冠状病毒 ‑2(SARS‑ CoV‑2)疫苗方面取得了显著成效， 这促使纳米技术的发展与进步， 以满足各种医疗需求。 同 时， 肿瘤纳米药物可通过血液循环靶向肿瘤， 并减少正常器官的蓄积， 具有很大的临床价 值。 与传统的化学治疗相比， 纳米药物可显著延 长疗程， 提高生物利用度， 增强疗效， 并最大 限度地减少全身副作用。 然而， 通过静脉注射的纳米药物可能会被宿主单核吞噬细胞系统 (MPS)清除， 影响其药代动力学， 导致其瘤内药物蓄积不足。 为了延长纳米药物的体内循环 时间， 已经开发了一些纳米药物 “隐身”策略， 如合成聚合物(聚乙二醇， 聚 ‑L‑谷氨酸等)或 两性离子聚合物。 尽管这些材料相对惰性， 但也有报道称聚乙二醇化的纳米药物可能会激 活固有免疫， 导 致其从血液循环中清除， 从而降低药效且不能减少药物的系统毒性。 [0003]为改善纳米药物的药代动力学， 目前开发了仿生细胞膜包被的纳 米载药平台以增 强其在生物医学中的应用。 这些仿生纳米平台由合成的纳米颗粒核心和包被在外面细胞膜 构成。 由于其外层保留了细胞膜的脂质和蛋白等成分， 使其能够特异 性中和某些致病分子、 免疫逃逸、 延 长血液循环并促进病灶处的药物蓄积。 目前， 已有多种类型的细胞膜被用于仿 生纳米药物 递送平台的制备， 包括红细胞、 白细胞、 血小板、 肿瘤细胞和干细胞等。 在这些细 胞类型中， 免疫细胞备受关注。 巨噬细胞是骨髓来源的白细胞， 可感知趋化信号， 且具有高 效的肿瘤靶向能力。 除此之外， 有报道称巨噬细胞还能传统化疗药物无法到达的肿瘤乏血 管区域。 因此， 基于巨噬细胞膜的仿生纳米载 药平台具有独特的优势和良好的应用前 景。 [0004]通常， 肿瘤治疗药物以非共价形式装载在细胞膜包被的纳 米载体中。 然而， 物理包 被的药物较易从递送平台上释放出来， 增加药物的代谢速度， 药代动力学特性差。 此外， 毒 性化疗药物在血液循环中的迅速释放会导致较大的系统毒性。 对母药进 行化学键修饰形成 前药， 使其在体内需通过酶和/或化学反应断键裂解转化为活性母药才能发挥作用， 从而显 著改善其理化 性质或体内性能。 发明内容 [0005]我们先前的研究表明， 抗肿瘤药物 7‑乙基‑10‑羟基喜树碱(S N38)可通过酯键与聚 己内酯(PCL)可逆性连接， 得到前药分子PCLn‑SN38。 该前药易被 组装在聚乙二醇 ‑b‑聚己内 酯共聚物(如PEG10k‑b‑PCL10k)中， 以形成可系统给药的纳米药物。 前药包裹于载体后， 可显 著降低血液中游离药物浓度， 且表现出活性SN38药物的酯酶响应性释放。 因此， 这种方法显 著减小了药物毒性， 使药物 注射剂量有所提高。 [0006]本发明涉及将7 ‑乙基‑10‑羟基喜树碱(SN38)与聚己内酯  (poly‑ε‑ caprolactone， PCL)通过共价偶联形成的前药和卵磷脂， 胆固醇，  DSPE‑PEG2k， DDAB/DOTAP说　明　书 1/8 页 3 CN 115089561 A 3