(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210688609.7 (22)申请日 2022.06.17 (71)申请人 广州中医药大学 （广州中 医药研究 院） 地址 510405 广东省广州市机场路12号大 院 (72)发明人 翟筠秋　彭卓　梁光忠　宁科妮　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 专利代理师 段卉 (51)Int.Cl. A61K 47/66(2017.01) A61K 47/52(2017.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 45/00(2006.01)A61K 31/555(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 33/243(2019.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种APE1响应型靶向药物递送载体及其制 备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种APE1响应型靶向药物递 送载体及其制备方法和应用， 所述制备方法包括 以下步骤： S1.将药物溶液与双链结构的AP ‑DNA 溶液混合， 室温避 光孵育0.5～1.5h， 制备得到载 药AP‑DNA复合物； S2.将步骤S1制备得到的载药 AP‑DNA复合物与亲和素修饰的磁性纳米材料的 溶液混合， 室温充分反应， 洗涤， 即得。 利用本发 明的制备方法制备的APE1响应型靶向药物递送 载体， 将APE1作为触发纳米载体的释药 “开关”， 纳米粒进入肿瘤细胞后迅速被APE1特异性识别 并切割， 实现协 同靶向递送药物； 同时能够通过 磁靶向准确、 主动靶向肿瘤组织， 提高药物在肿 瘤部位的富集效率， 增强药物的治疗效果， 降低 毒副作用。 权利要求书1页 说明书13页 附图14页 CN 115252812 A 2022.11.01 CN 115252812 A 1.一种APE1响应型靶向药物递送载体的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1.将药物溶液与双链结构的AP ‑DNA溶液混合， 室温避光孵育0.5～1.5h， 制备得到载 药AP‑DNA复合物； S2.将步骤S1制备得到的载药AP ‑DNA复合物与亲和素修饰的磁性纳米材料的溶液混 合， 室温充分反应， 洗涤， 即得APE1响应型靶向药物递送载体。 2.根据权利要求1所述制备方法， 其特征在于， 步骤S1中所述药物溶液与双链结构的 AP‑DNA溶液以摩尔比为25： 1～6混合。 3.根据权利要求2所述制备方法， 其特征在于， 步骤S1中所述药物溶液与双链结构的 AP‑DNA溶液以摩尔比为25： 1～5混合。 4.根据权利要求3所述制备方法， 其特征在于， 步骤S1中所述药物溶液与双链结构的 AP‑DNA溶液以摩尔比为25： 5混合。 5.根据权利 要求1所述制备方法， 其特征在于， 步骤S1中所述双链结构的AP ‑DNA包括第 一单链和第二单链， 所述第一单链或第二单链的序列长度为3 0～100bp。 6.根据权利要求1所述制备方法， 其特征在于， 所述步骤S1中药物溶液中的药物为阿霉 素或铂类药物。 7.根据权利要求6所述制备 方法， 其特 征在于， 所述药物溶 液中的药物为阿霉素。 8.根据权利要求1所述制备方法， 其特征在于， 步骤S2中所述亲和素修饰的磁性纳米材 料为亲和素修饰的羧基二氧化硅四氧化 三铁。 9.利用权利要求1～8任一所述制备 方法制备 得到的APE1响应型靶向药物递送载体。 10.权利要求9所述APE1响应型靶向药物递送载体在制备抗肿瘤药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115252812 A 2一种APE1响应型靶向药物递 送载体及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及纳 米材料与肿瘤学技术领域， 具体涉及一种APE 1响应型靶向药物递送 载体及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]肿瘤微环境是由多种细胞类型组成的复杂 组织， 包括血管内皮细胞、 肿瘤相关成 纤维细胞、 免疫细胞、 肿瘤干细、 周细胞以及非细胞成分， 如细胞外基质和分泌的细胞外分 子。 肿瘤微环境与正常细胞有很大不同， 如由于肿瘤细胞快速增殖而血管来不及生长导致 的血管异常； 肿瘤深部血管疏松缺乏足够的氧气导致的缺氧环境， 促进糖酵解产生乳酸， 形 成较低pH的细胞环境。 同时， 致密 而紊乱的细胞也会导致细胞间质压增强， 促进 药物外排而 产生耐药性， 如何有效治疗肿瘤依旧为世纪难题。 [0003]传统抗癌药物临床毒副作用大、 依从性差， 治疗效果也非常有限。 酶作为一种具有 代表性的内源性刺激， 参与多种关键的生理过程， 在许多疾病相关的微环境中表现出不同 的表达水平。 与其他类型的刺激相比， 利用酶作为刺激具有许多优点。 酶是内源性的， 不需 要添加外部刺激， 如磁场、 超声或光， 这提供了固有的生物相容性和生物安全的优点。 此外， 大多数酶反应快速、 高效， 反应条件温和(温和温度、 pH和水溶液)。 酶也可以对其底物表现 出非凡的特异性和选择性， 从而可以产生可控的化学反应和生物反应。 到目前为止， 蛋白 酶、 酯酶、 磷酸酶、 激酶和氧化还原酶是报道最广泛的酶类刺激物。 随着对酶活性的深入了 解， 许多酶被用作肿瘤诊断或预后的生物标志物。 诊断探针可以通过将酶识别底物与成像 剂连接来设计， 通过酶对底物进行特异性酶处理后， 探针可以恢复其信号， 从 “关闭”到“打 开”状态。 在另一个重要的应用中， 探索酶敏感的前药， 以实现治疗药物在靶组织中的选择 性激活， 同时减少毒性副作用。 [0004]无嘌呤无嘧啶核酸内切酶1(Apurinic/apyrimidinic  endonuclease  1,APE1)是 一种具有DNA修复和转录调节功能的多功能蛋白质， 在控制细胞对氧化应激反应方面具有 多重作用， 是真核细胞中主要的无嘌呤无嘧啶核酸内切酶， 在所有DNA损伤的碱基切除修复 (BER)通路中起关键作用。 APE1能特异性识别和水解5'端附近的DNA无嘌呤无嘧啶(AP)位 点， 产生一个带有3' ‑羟基和5'‑脱氧核糖磷酸基的缺口， 或通过其氧化还原功能激活某些 转录因子的DNA结合活性。 在正常细胞中， APE1主要存在于细胞核中。 在大多 数肿瘤细胞中， 由于旺盛的复制转录活动， 不仅是细胞核， 细胞质中也会有较高的酶浓度， 且浓度是正常细 胞内的数倍。 近年来的研究表明， AP E1的表达量及其在细胞内分布的变化与癌细胞的增殖、 分化和凋亡等密切相关， 如乳腺癌， 非小细胞肺癌， 前列腺癌。 且APE1在血清中的含量也会 随着人体的病变发生变化， 因此APE1可以作为肿瘤检测的生物标志物。 现有技术公开了一 种磁性复合纳米颗粒， 该磁性复合纳米颗粒表面通过亲和素 ‑生物素连接的含脱碱基位点 DNA双链可被目标蛋白脱碱基核酸内切酶I特异 性地识别和切割； 虽然改专利记载可与将其 内的荧光基团替换成抗癌药物， 但是如何将药物替换上去， 替换何种 药物可以更好的发挥 靶向递药的作用， 仍需进一 步研究。说　明　书 1/13 页 3 CN 115252812 A 3