(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221070486 6.5 (22)申请日 2022.06.21 (71)申请人 中国科学院西北高原生物研究所 地址 810001 青海省西宁市城西区新宁路 23号 (72)发明人 于瑞涛　曹静亚　陶燕铎　梅丽娟　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 王宁宁 (51)Int.Cl. C07D 311/94(2006.01) C07D 307/58(2006.01) C07C 49/707(2006.01) C07C 49/713(2006.01) C07C 45/79(2006.01)C07C 45/80(2006.01) C07H 15/203(2006.01) C07H 1/08(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 水母雪莲中七种倍半萜类化合物及其提取 分离方法和应用 (57)摘要 本发明公开了水母雪莲中七种倍半萜类化 合物及其提取分离方法和应用， 属于中药提取、 分离技术领域。 本发明七种倍半萜 类化合物分子 式分别为C15H18O3、 C15H18O4、 C15H20O3、 C19H30O7、 C11H16O3、 C11H18O4和C10H16O3。 本发明采用乙醇回流 提取、 MCI柱层析、 薄层层析、 硅胶柱层析、 SephadexLH ‑20柱层析、 高效液相色谱进行分离 纯化与制备， 采用ESIMS、1H‑NMR、13C‑NMR、 HQBC、 HMBC及2DNMR鉴定结构。 本发明倍半萜类化合物 及其衍生物可以作为其他化合物 合成先导物， 以 及新药开发和药理活性研究的原料， 用于制备抗 肿瘤作用的药物。 权利要求书2页 说明书7页 附图26页 CN 114853713 A 2022.08.05 CN 114853713 A 1.水母雪莲中七种倍半萜类化 合物， 其特 征在于， 结构式如式1～7 所示 式4中， R为 ‑O‑β‑D‑glc或‑OH中的一种。 2.权利要求1所述的水母雪莲中七种倍半萜类化合物的提取分离方法， 其特征在于， 包 括以下步骤： (1)将水母雪莲用乙醇回流提取， 将提取液浓缩制得药液， 将药液悬浮在水上， 依次用 石油醚、 乙酸乙酯和正 丁醇萃取， 得到石油醚部位、 乙酸乙酯部位和正 丁醇部位； (2)将步骤(1)得到的乙酸乙酯部位上MCI凝胶柱， 用甲醇 ‑水溶液梯度洗脱， 收集组分， 用薄层层析法合并相似组分， 依次得到组分F1～F 7； (3)将步骤(2)得到的组分F2， F4， F5分别上硅胶柱， 用二 氯甲烷‑甲醇溶液梯度洗脱， 依 次得到组分F2a～ 2g、 F4a～F4g、 F5a～F5g； (4)将步骤(3)得到的组分F5b、 F5d分别上Sephadex  LH‑20柱， 用甲醇 ‑水溶液梯度洗 脱， 依次得到组分F5b1～F5b4、 F5d1～F5d4； (5)将步骤(3)、 (4)得到的组分F2a、 F4e、 F4d、 F5b2， F5d1经高效液相色谱分离， 得到所 述倍半萜类化 合物。 3.根据权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述乙醇的浓度为 50％～95％， 所述乙醇与所述水母雪莲的液固比(8～30mL)： 1g； 所述回流提取的次数为3 次， 每次回流提取的时间为2h 。 4.根据权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述甲醇 ‑水溶液中甲 醇的体积比为0％～100％， 所述梯度洗脱甲醇的体积比依次为0％、 10％、 30％、 50％、 70％、 90％， 100％。 5.根据权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤(3)中所述二氯甲烷 ‑甲醇溶 液中二氯甲烷与甲醇的体积比为400:1～1:1， 所述梯度洗脱二氯甲烷与甲醇的体积比依次 为400:1、 200:1、 100:1、 50： 1， 30： 1， 10:1， 1： 1。 6.根据权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤(4)中所述甲醇 ‑水溶液中甲 醇的体积比为0％～100％， 所述梯度洗脱甲醇的体积比依次为0％、 10％、 30％、 50％、 70％、 90％， 100％。 7.根据权利要求2所述的提取分离方法， 其特征在于， 步骤(5)中所述高效液相色谱分 离是以体积分数为5 5％甲醇水 溶液为流动相进行等度洗脱。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114853713 A 28.权利要求1所述的水母雪莲中七种倍半萜类化 合物在制备抗肿瘤药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114853713 A 3