(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210708650.6 (22)申请日 2022.06.22 (71)申请人 中南大学湘雅三医院 地址 410013 湖南省长 沙市桐梓坡路138号 中南大学湘雅三医院 (72)发明人 刘建业　刘镓浩　刘彪　胡兴　 (74)专利代理 机构 长沙优企知识产权代理事务 所(普通合伙) 43243 专利代理师 刘佳芳 (51)Int.Cl. A61K 31/7068(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 核酸适配体-药物结合物EpCA M-GEMs在制备 治疗膀胱癌药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了核酸适配体 ‑药物结合物 EpCAM‑GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用。 EpCAM核酸适配体通过3 ’ ‑5’磷酸二酯键与吉西 他滨药物分子相连接， 本发明的实验结果发现 EpCAM‑GEMs通过空间构象与膀胱癌细胞膜表面 高表达的EpCAM蛋白靶向结合， 在血清中稳定并 通过大胞饮入胞方式在胞内磷酸酶作用下释放 出吉西他滨 （GEM)， 发挥细胞毒 性作用， 在膀 胱癌 干细胞中我们也发现EpCAM ‑GEMs具有类似 的靶 向性及毒性。 此外， EpCAM ‑GEMs在皮下异种移植 瘤模型、 肺 转移瘤模型和原位膀胱肿瘤模型中均 能抑制膀胱癌的生长和转移， 且体内毒性不明 显。 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图5页 CN 115040529 A 2022.09.13 CN 115040529 A 1.核酸适配体‑药物结合物EpCAM ‑GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用。 2.根据权利要求1所述应用， 其特 征是， 所述核酸 适配体EpCAM的源序列为SYL3 C序列。 3.根据权利要求1所述应用， 其特 征是， EpCAM ‑GEMs的序列如SED  ID NO1所示。 4.权利要求1所述应用， 其特征是， 所述膀胱癌包括非肌层浸润性膀胱癌， 肌层浸润性 膀胱癌， 膀胱原位癌， 转移性膀胱癌。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115040529 A 2核酸适配体 ‑药物结合物EpCAM ‑GEMs在制备治疗膀胱癌药物 中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及核酸适配体 ‑药物结合物EpCAM ‑GEMs在 制备治疗膀胱癌药物中的应用。 背景技术 [0002]膀胱癌是世界上最常见的十大恶性疾病之一， 根据肿瘤 生长深度分为非肌肉浸润 性膀胱癌(NMIBC)和肌肉浸润性膀胱癌(MIBC)。 其死亡率高并在世界范围内差异不大， 治疗 效果不理想。 手术与化疗相结合是目前治疗膀胱癌的常用方法， 经尿道膀胱肿瘤电切术 (TURBT)及术后化疗 是治疗NMIBC的主要 方案， 根治性膀胱切除及新辅助化疗联合辅助化疗 是治疗MIBC及高危复发NMIBC的主要方法。 NMIBC治疗后约50%～80%患者出现肿瘤复发， 约 30%患者出现肿瘤进展， NMIBC治疗后复发率高达30～45％， 5年生存率为45～66％。 吉西他 滨作为膀胱癌的一线化疗药物之一， 是一种胞嘧啶核衍生物， 属于嘧啶类抗肿瘤药物， 其作 用机制是干扰癌细胞DNA 合成和复制。 但吉西他滨的药代动力学较差， 且不能明确区分正常 细胞和癌细胞， 并有肝功能异常、 胃肠道反应、 骨髓抑制等不良作用， 且由于这些副作用的 存在限制 了其剂量的使用。 总之， 缺 乏特异性和对化疗副作用的不耐受阻碍了吉西他滨治 疗的效果。 [0003]随着膀胱癌分子生物学和遗传学的发展， 免疫检查点抑制剂(ICIs)、 靶向治疗和 抗体药物 缀合物(AD C)以及基因治疗在 膀胱癌治疗中的应用已经出现。 然而， 自ICIs药物引 入以来， 耐药性、 脱靶效应和免疫相关不良事件频繁报道。 尽管AD C的药物可以靶向癌细胞， 但由于高免疫原性和 不良事件的发生,包括其毒性导致的血液系统疾病以及脱靶效应， 仅 适用于晚期膀胱癌患者和不适用铂类治疗的患者。 基因治疗以FGFR抑制剂为代表， 用于晚 期膀胱癌， 而FGFR突变只出现在一部分患者中， 要进行筛查， 筛查标准目前还不明确， 也有 报道称， 只有一小部分FGFR突变异常的恶性肿瘤对FGFR抑制剂有反应， FGFR抑制剂也可能 对药物产生耐药性， 并由于脱靶效应产生高磷血症等不良反应。 因此， 虽然这些治疗方法为 膀胱癌的治疗带来了希望， 但临床应用副反应明显， 具有一定局限性， 不能使所有患者受 益， 导致膀胱癌的治疗仍未达 到理想的效果。 所以， 膀胱癌的治疗迫切需要新的治疗方法。 [0004]核酸适配体和化疗药物的结合(APDC)可以很好的解决这些问题， 上皮细胞粘附分 子(EpCAM)是一种在肿瘤细胞和肿瘤干细胞(CSC)中表达的生物标志物， 被认 为是肿瘤相关 的抗原， 参与调节细胞间黏附， 介导信号传导、 细胞迁移、 增殖和分化等功能。 EpCAM的表达 在结肠癌、 卵巢癌、 视网膜母细胞瘤、 胆囊癌、 乳腺癌、 前列腺癌中均有报道。 [0005]EpCAM核酸 适配体与吉西他滨的结合未 见相关报道。 发明内容 [0006]针对现有膀胱癌治疗技术的不足， 本发明目的是探究核酸适配体 ‑药物结合物 EpCAM‑GEMs对膀胱癌的靶向性及毒性， 此外在动物荷瘤模型验证EpCAM ‑GEMs抗肿瘤效果和说　明　书 1/7 页 3 CN 115040529 A 3