(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210710448.7 (22)申请日 2022.06.22 (71)申请人 天津科技大 学 地址 300457 天津市滨 海新区经济技 术开 发区第十三大街9号 (72)发明人 刘安军　张海波　 (74)专利代理 机构 天津盛理知识产权代理有限 公司 12209 专利代理师 韩晓梅 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A61K 31/715(2006.01) A61K 36/07(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种新型灰树花酸提多糖和其制备方法及 其抗肿瘤的应用 (57)摘要 本发明涉及一种灰树花酸提多糖， 该多糖是 采用酸提取法和醇沉法获得。 制备方法为： 烘干 灰树花子实体， 破碎， 过筛， 按照一定的料液比用 1％稀盐酸溶液浸泡灰树花粉末， 置于室温下固 定时间， 分离原料收集浸提液， 不断反复冻融浸 提液至原体积的五分之一， 加入无水乙醇醇沉 (终浓度30％)， 离心取上清， 再加无水乙醇醇沉 (终浓度40％)， 离心取沉淀， 待乙醇完全挥发， 添 加水溶解， 离心， 收集上清液进行分离纯化， 最终 冷冻干燥得到灰树花酸提多糖。 S180荷瘤小鼠实 验可得给予灰树花酸提多糖治疗后其肿瘤抑制 率达到42.5 7％。 本发明可模拟人体胃酸环境， 更 加高效地提取灰树花多糖物质， 且能够更高效地 发挥灰树 花中多糖成分的抗肿瘤活性。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115197336 A 2022.10.18 CN 115197336 A 1.一种灰树 花酸提多糖， 该多糖是采用酸 提取法和醇沉法制备。 2.根据权利要求1所述的灰树 花酸提多糖的制备 方法， 其特 征在于： 步骤如下： (1)烘干灰树花子实体， 破碎， 过网筛(80目)， 按照一定的料液比用1％稀盐酸溶液浸泡 灰树花粉末， 随后置于 室温下固定时间， 把原材料与浸提液分开收集浸提液， 不断反 复冻融 浸提液， 到剩余原溶 液的五分之一体积， 得到浸提浓 缩液； (2)向步骤(1)得到的浸提浓缩液中， 加入无水乙醇溶液至体积分数30％， 冷冻离心 (8000r/min， 10min)， 取上清液， 添加无水乙醇醇沉至体积分数40％， 离心(条件同上)， 留用 沉淀， 待乙醇完全挥发， 添加水 溶解， 离心(条件同上)， 最后收集上清液进行分离纯化处 理； (3)把步骤(2)得到的上清液， 依次采用分级醇沉、 Sevag法除蛋白、 透析、 反复冻融， 最 终冷冻干燥， 得到纯化后的灰树 花酸提多糖。 3.根据权利要求2所述的灰树花多糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)用1％稀盐酸溶 液浸泡灰树 花粉末。 4.根据权利要求2所述的灰树花多糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)不断反复冻融 浸提液， 到剩余原溶 液的五分之一体积， 得到浸提浓 缩液。 5.根据权利要求2所述的灰树花多糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(2)加入无水乙醇 溶液至体积分数3 0％， 并弃沉淀取 上清。 6.根据权利要求2所述的灰树花多糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(2)添加无水乙醇 醇沉至体积分数40％， 离心取沉淀， 待乙醇完全挥发， 添加水 溶解， 离心收集上 液。 7.根据权利要求2所述的灰树花多糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(3)采用分级醇沉、 Sevag法除蛋白、 透析、 反复冻融， 最终冷冻干燥， 制备 出灰树花酸提多糖。 8.一种权利要求1所述的灰树 花酸提多糖在抗肿瘤领域的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115197336 A 2一种新型灰树花酸提多糖和其制备方 法及其抗肿瘤的应用 技术领域 [0001]本发明属于灰树花酸提多糖活性研究领域， 涉及其抗肿瘤活性的应用， 尤其是一 种酸法提取 灰树花多糖和其制备 方法及其 抗肿瘤的应用。 背景技术 [0002]灰树花(Grifola  frondosa)， 俗称舞茸， 从属于真菌门、 非褶菌目、 树花属， 归属于 食药同源真菌， 以有营养、 口味诱人、 特殊气味而著名。 在中国， 广泛分布于河北、 浙江和云 南等地。 在中医药学中， 灰树花是安全无毒， 性平味甘， 有润肺护肝， 健脾助气的特效， 用于 小便不通、 身体水肿、 糖尿病、 肝硬化等疾病的临床诊疗。 灰树花含碳水物质、 蛋白、 维生素、 甾类、 酚类和矿物质。 据文献报道， 灰树花有抗氧化、 抗肿瘤及调节免疫力等活性。 自上世纪 80年代初， 研究者便从灰树 花中提取多糖并探究其 生理活性。 [0003]本发明采用酸提取法和醇沉法制备灰树花酸提多糖， 经分级醇沉、 Sevag法去除蛋 白、 透析和反 复冻融分离纯化后， 制备出一种新型灰树花酸提多糖， 再对该酸提多糖进行结 构鉴定， 最后做S180荷 瘤小鼠动物实验， 发现灰树 花酸提多糖有显著地体内抗肿瘤活性。 发明内容 [0004]本发明的目的是对灰树花的子实体采取常温酸法提取工艺， 旨在模仿人体胃酸环 境下消化和吸收灰树花中活性物质多糖的过程。 用酸法提取制备一种新型灰树花酸提多 糖， 然后对该多糖物质做分离纯化、 结构鉴定及其体内抗肿瘤活性的实验。 [0005]本发明解决其 技术问题是采取以下技 术方案实现的： [0006]一种灰树 花酸提多糖， 该多糖采用酸 提取法和醇沉法制备。 [0007]一种灰树 花酸提多糖的制备 方法， 步骤如下： [0008](1)烘干灰树花子 实体， 破碎， 过网筛(80目)， 按照一定的料液比用1％稀盐酸溶液 浸泡灰树花粉末， 随后置于 室温下固定时间， 把原材料与浸提液分开收集浸提液， 不断反复 冻融浸提液， 到剩余原溶 液的五分之一体积， 得到浸提浓 缩液； [0009](2)向步骤(1)得到的浸提浓缩液中， 加入无水 乙醇溶液至体积分数30％， 冷冻离 心(8000r/min， 10min)， 取上清液， 添加无水乙醇醇沉至体积分数40％， 离心(条件同上)， 留 用沉淀， 待乙醇完全挥发， 添加水溶解， 离心(条件同上)， 最后收集上清液进行分离纯化处 理； [0010](3)把步骤(2)得到的上清液， 依次采用分级醇沉、 Sevag法除蛋白、 透析、 反复冻 融， 最终冷冻干燥， 得到纯化后的灰树 花酸提多糖。 [0011]而且， 步骤(1)用1％稀盐酸溶 液浸泡灰树 花粉末。 [0012]而且， 步骤(1)不断反复冻融浸提液， 到剩余原溶液的五分之一体积， 得到浸提浓 缩液。 [0013]而且， 步骤(2)加入无 水乙醇溶 液至体积分数3 0％， 并弃沉淀取 上清。 [0014]而且， 步骤(2)添加无水乙醇醇沉至体积分数40％， 离心 取沉淀， 待乙醇完全挥发，说　明　书 1/5 页 3 CN 115197336 A 3