ICS 71.040.99 B 441 45 4 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 CCS DBB45/T 226 60—2021 黑 蚁及其其制品 黑蚂蚁 品中蚁酸的测测定 DDeterminaation of formic acid in Polyrhac chis viccina Roge er and it's products 2021 - 02 - 05 发布 发 广西壮 壮族自治区 区市场监督 督管理局 2021 - 03 0 - 05 实施 实 发 布 目 次 — DB45/T 2260 2021 前言 ................................................................................ III 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 原理 ............................................................................... 1 5 试剂 ............................................................................... 1 6 仪器设备 ........................................................................... 1 7 实验步骤 ........................................................................... 2 7.1 试样处理 ....................................................................... 2 7.2 仪器参考条件 ................................................................... 2 7.3 标准曲线的制作 ................................................................. 2 7.4 样品测定 ....................................................................... 2 7.5 空白试验 ....................................................................... 3 7.6 分析结果的表述 ................................................................. 3 8 精密度 ............................................................................. 3 附录 A（规范性） 蚁酸标准品气相色谱图 .................................................. 4 I — DB45/T 2260 2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西检验检疫标准化技术委员会提出、归口并宣贯。 本文件起草单位：南宁海关技术中心、广西古岭龙投资集团有限公司。 本文件主要起草人：赵永锋、李湧、刘新生、吕春秋、胡超伟、覃金兰、杨利平、谭春翠、谭茶丽、 杨治凤、麦旖旎、潘丽翠、曾宁、龙凯龙。 III DB45/T 2260—2021 黑蚂蚁及其制品中蚁酸的测定 1 范围 本文件采用顶空气相色谱法对黑蚂蚁及其制品中蚁酸进行测定。 本文件适用于黑蚂蚁及其制品中的蚁酸的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 3 术语和定义 3.1 下列术语和定义适用于本文件。 黑蚂蚁 Polyrhachis vicina Roger 又称拟黑多刺蚁, 多刺蚁属，一种具有多种药用价值的黑色昆虫。 4 原理 在密闭容器内，蚁酸（甲酸）在硫酸介质中与乙醇酯化生成甲酸乙酯，经一定温度与时间的气液平 衡后，抽取顶空气注入气相色谱分析，以保留时间定性，峰面积定量。 5 试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 中规定的一级水。 无水乙醇：色谱纯。 浓硫酸：优级纯。 20%硫酸乙醇溶液：20 mL 浓硫酸缓慢加入到 80 mL 乙醇中，边加边搅拌，冷却至室温。 甲酸标准溶液：精确称取色谱纯甲酸标准品 0.250 0 g，用纯水定容至 50 mL 容量瓶中，摇匀；取 此溶液 5.00 mL，用水稀释至 50 mL 容量瓶中，摇匀，即得到甲酸浓度为 5 mg/mL 的储备液。使用时再稀 释为 0.5 mg/mL 的标准中间工作液。 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 6 仪器设备 6.1 6.2 6.3 气相色谱仪：带氢火焰离子化检测器和自动顶空进样器。 顶空瓶：20 mL，配备铝质钳口瓶盖和硅橡胶镉垫。 分析天平：感量为 0.1 mg。 1 — 容量瓶：100 mL。 移液器：1.00 mL 和 5.00 mL。 DB45/T 2260 2021 6.4 6.5 7 实验步骤 7.1 试样处理 7.1.1 固体样品 称取1 g（精确到0.001 g）均质后的黑蚂蚁样品到100 mL容量瓶中，加入80 mL水，密封后超声提取 30 min，冷却至室温，加水定容。吸取2.00 mL试样至顶空瓶中，加入20%硫酸乙醇溶液2.00 mL，用手轻 微摇匀后密封。保持顶空进样瓶直立，待分析。 7.1.2 液体样品 吸取2.00 mL试样至顶空瓶中，加入20%硫酸乙醇溶液2.00 mL，用手轻微摇匀后密封。保持顶空进样 瓶直立，待分析。 7.2 仪器参考条件 7.2.1 顶空进样条件 进样条件如下： a) 平衡温度 75 ℃；加热平衡时间 50 min； b) 取样针温度 100 ℃；传输线温度 110 ℃； c) 气液平衡时间 1 min；进样时间 0.2 min；拔针时间 0.4 min，顶空瓶压力 23 psi。 7.2.2 气相色谱条件 气相色谱条件如下： a) 色谱柱：HP-INNOWax，30 m×0.32 mm × 0.5μm，或相当者； b) 柱温度程序：40 ℃保持 2 min,以 8 ℃/min 的速率升温至 90 ℃（保持 4 min）,再以 20 ℃/min 速率升温至 230 ℃（保持 5 min）； c) 进样口温度：220 ℃； d) 检测器：温度 250 ℃，氢气流速 30 mL/min，空气流速 300 mL/min； e) 进样模式：分流模式，分流比：20:1； f) 载气氮气流速：1.5 mL/min； g) 汽化室平衡温度：75 ℃；定量管温度：90 ℃；传输线温度：100 ℃。 7.3 标准曲线的制作 分别取甲酸标准溶液（0.5 mg/mL）0.25 mL、0.50 mL、0.75 mL、1.00 mL、1.25 mL、1.50 mL至顶空 瓶中，补加水至2.00 mL，混匀后加入20%硫酸乙醇溶液2.00 mL用手轻微摇匀后密封，待上机。以补加水 至2.00 mL之后的甲酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。 7.4 样品测定 将制备好的试样上机分析后，测得其峰面积，根据相应标准曲线，计算出试样中蚁酸含量，蚁酸标 准品气相色谱图参见附录A。 2 DB45/T 2260—2021 7.5 空白试验 以40%的乙醇溶液为空白试样，按7.1～7.4的规定执行。 7.6 分析结果的表述 含量按式（1）计算。 黑蚂蚁中蚁酸的 X = A × 1000 × n m × 1000 ·································································· (1) 式中： X——试样中蚁酸含量，单位为 g/kg 或 g/L； A——由标准曲线得到的试样中蚁酸的含量，单位为 mg/mL； n——样品的稀释倍数； m——试样量，单位为 g 或 mL。 计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字。 8 精密度 重复 获得 两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的 10%。 固体 量 mg/kg，液体样品定量限 2.0 mg/L。 8.1 在 条件下 的 8.2 本方法 样品定 限 50 3 —2021 DB45/T 22660 A A 附 录 A （规范性） 蚁酸标 标准品气相色谱图 蚁酸标标准品气相色色谱图参见图AA.1。 图A.1 4 蚁酸标准 准品气相色谱 谱图 中华人民共和国广西地方标准 黑蚂蚁及其制品中蚁酸的测定 DB 45/T 2260―2021 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究