ICS 67.080.10 B 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2742—2015 水果及制品可溶性糖的测定 3,5-二硝基 水杨酸比色法 Determination of soluble sugar in fruits and derived products- 3, 5-dinitrosalicylic acid colorimetry 行业标准信息服务平台 2015-05-21发布 2015-08-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T2742—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出。 本标准由全国果品标准化技术委员会（SAC/TC510）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心（兴城）。 本标准主要起草人：聂继云、李志霞、匡立学、李静、李海飞、徐国锋、闫震。 行业标准信息服务平台 I NY/T 2742—2015 水果及制品可溶性糖的测定3，5-二硝基水杨酸比色法 1范围 本标准规定了水果及制品中可溶性糖含量测定的3，5-二硝基水杨酸比色法。 本标准适用于水果及制品中可溶性糖含量的测定。 本标准的检出限为2.0mg/L，线性范围为0~120.0mg/L。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 可溶性非还原糖经酸化后可转化为还原糖。在碱性条件下，3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被 还原生成棕红色的氨基化合物，利用分光光度计在540nm波长下测定棕红色物质的吸光度值，其吸光 度值与还原糖含量成正比。 4试剂和材料 除非另有规定，在分析中仅使用分析纯试剂，实验用水符合GB/T6682的三级水指标。 4.16mol/L氢氧化钠溶液：称取240.0g氢氧化钠于1000mL烧杯中，用水溶解定容至1000mL容 量瓶中。 4.22mol/L氢氧化钠溶液：称取80.0g氢氧化钠于500mL烧杯中，用水溶解定容至1000mL容量 瓶中。 4.30.1mol/L氢氧化钠溶液：称取0.400g氢氧化钠（NaOH)于100mL烧杯中，溶解定容至100mL。 4.43，5-二硝基水杨酸(DNS)试剂：将6.3gDNS和262mL2mol/L氢氧化钠溶液（4.2)加人到含 185g酒石酸钾钠（C,H,OKNa4H,O)的500mL热水中，再加人5g苯酚和5g亚硫酸钠（Na2SO）， 搅拌溶解，冷却，用水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。 4.5亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾K,Fe(CN)。·3H2O],用水溶解定容至100mL。 4.6乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn（OAc)2·2H,O],用少量水溶解后加人3mL冰乙酸，用水定 容至100mL。 4.76mol/L盐酸溶液：在500mL的烧杯中加入100mL水，量取100mL盐酸缓缓加人烧杯中，边加 边搅拌，混匀后装入储液瓶备用。 4.81mg/mL葡萄糖标准溶液：准确称取0.1000g经80℃干燥2h的葡萄糖（CHzO,）标准物质，溶 解定容至100mL。现用现配。 4.9甲基红指示剂：称取0.10g甲基红溶于3.72mL0.1mol/L氢氧化钠溶液（4.3）中，稀释至 250mL，装人滴瓶。 5仪器设备 5.1分光光度计。 1 NY/T 2742—2015 5.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。 5.3鼓风干燥箱。 5.4恒温水浴锅：室温至100℃。 5.5容量瓶：50mL、100mL、250mL1000ml。 5.6具塞刻度试管：10mL或20mL。 6样液制备 6.1新鲜水果 果实洗净擦干，取可食部分，切碎混勺，四分法取样，用组织捣碎机制成匀浆（多汁水果直接匀浆，含 水量小的水果匀浆前按1+1的比例加水）。称取10.00g（m）试样，用水洗人容量瓶中，加人亚铁氰化 钾溶液（4.5）和乙酸锌溶液（4.6）各3mL，摇匀，定容至250mL（V），放置片刻，过滤，滤液备用。 6.2水果干制品 按GB5009.3测定含水量。果干、脆片等样品（ml）经（60土2)℃鼓风干燥后，称量（m2），用粉碎机 粉碎，过0.5mm筛。称取1.00g～5.00g（m）试样于锥形瓶中，加少量水于80℃水浴中加热提取 10min，用水洗人容量瓶中，冷却，定容至250mL（V），放置片刻，过滤，滤液备用。 6.3其他水果制品 水果罐头直接制成勾浆，称取10.00g（m）试样，用水洗入250mL容量瓶中，此后操作同6.1。果 汁、果酒、果醋等液体水果制品，混匀，称取10.00g～25.00g（m），用水洗人250mL容量瓶中，此后操 作同6.1。果酱、果泥等制品，混匀，称取2.00g～5.00g（m），用水洗人容量瓶中，定容至250mL(V）， 放置片刻，过滤，滤液备用。 7分析步骤 7.1标准曲线的绘制 用移液管分别准确吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL葡萄糖标准溶液（4.8）于6 支10mL具塞刻度试管中，加水使溶液体积补至2.0mL，加人4.00mL3，5-二硝基水杨酸试剂（4.4)， 置沸水浴中加热5min。取出，立即置冷水中，冷却至室温，定容，摇匀。所得系列葡萄糖标准溶液浓度 分别为0mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL。用分光光度计 测定540nm吸光度值。以葡萄糖浓度（tng/mL）为纵坐标（y），吸光度值为横坐标（α），绘制标准曲线。 7.2还原糖的测定 根据不同样品中糖的含量，用移液管吸取滤液5mL20mL(V2)于容量瓶中，用水定容至100mL （V3）。从容量瓶中吸取1.00mL(V.）样液于10mL（V,）容量瓶或具塞刻度试管中，各加水至2.0mL。 以下按上述7.1标准曲线绘制的步骤操作。记录测定的吸光度值，从标准曲线求得测定液中还原糖的 浓度。 7.3可溶性糖的测定 根据样品含糖量高低，用移液管吸取样液5mL～10mL(V2）于容量瓶中，加人6mol/L盐酸溶液 （4.7)1mL，置恒温水浴锅中（80土2)℃加热10min，取出，置冷水槽中冷却至室温，加甲基红指示剂 （4.9)3滴，用6mol/L氢氧化钠溶液（4.1)中和至浅橙色，用水定容至100mL(V），混匀。以下按还原 糖的测定步骤操作。 7.4空白试验 除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。 8结果计算 除水果干制品外的样品可溶性糖含量以质量分数计，按式（1)计算。水果干制品可溶性糖含量以质 2 NY/T2742—2015 量分数计，按式（2)计算。 (1) m XV2X V X10 式中： X 样品中可溶性糖含量，单位为质量百分数（%）； 试样测定液中还原糖的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； Vi 样液定容体积，单位为毫升（mL）； V2 样液分取体积，单位为毫升（mL）； V3 分取样液定容体积，单位为毫升（mL）； V. 测定液吸取体积，单位为毫升（mL）； Vs 测定样液体积，单位为毫升（mL）； A 稀释倍数，多汁水果为1，含水量少的水果为2； 试样质量，单位为克（g）； m 10 测定结果换算为质量百分数的转换系数。 (2) mXmXV2XVX10 式中： 样品烘干前质量，单位为克（g)； mi m2一样品烘干后质量，单位为克（g）。 计算结果表示到小数点后两位。 9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的相对偏差不大于这两个测定值的算术平均值的10%。 行业标准信息服务平台 3 NY/T2742—2015 量分数计，按式（2)计算。 (1) m XV2X V X10 式中： X 样品中可溶性糖含量，单位为质量百分数（%）； 试样测定液中还原糖的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； Vi 样液定容体积，单位为毫升（mL）； V2 样液分取体积，单位为毫升（mL）； V3 分取样液定容体积，单位为毫升（mL）； V. 测定液吸取体积，单位为毫升（mL）； Vs 测定样液体积，单位为毫升（mL）； A 稀释倍数，多汁水果为1，含水量少的水果为2； 试样质量，单位为克（g）； m 10 测定结果换算为质量百分数的转换系数。 (2) mXmXV2XVX10 式中： 样品烘干前质量，单位为克（g)； mi m2一样品烘干后质量，单位为克（g）。 计算结果表示到小数点后两位。 9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的相对偏差不大于这两个测定值的算术平均值的10%。 行业标准信息服务平台 3 NY/T2742—2015 量分数计，按式（2)计算。 (1) m XV2X V X10 式中： X 样品中可溶性糖含量，单位为质量百分数（%）； 试样测定液中还原糖的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； Vi 样液定容体积，单位为毫升（mL）； V2 样液分取体积，单位为毫升（mL）； V3 分取样液定容体积，单位为毫升（mL）； V. 测定液吸取体积，单位为毫升（mL）； Vs 测定样液体积，单位为毫升（mL）； A 稀释倍数，多汁水果为1，含水量少的水果为2； 试样质量，单位为克（g）； m 10 测定结果换算为质量百分数的转换系数。 (2) mXmXV2XVX10 式中： 样品烘干前质量，单位为克（g)；