ICS67.050 Z 备案号： 全联农业产业商会标准 T/CAICC-02-2021 生乳中啶虫脒的快速检测 胶体金免疫层析法 Rapiddetectionofacetamipridinrawmilk —Colloidalgoldimmunochromatography 2021-12-31发布 2022-01-01实施 全联农业产业商会发布 全国团体标准信息平台 I目  次 前  言..............................................................................................................................................................II 1范围.................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.............................................................................................................................................1 3原理.................................................................................................................................................................1 4试剂与材料.....................................................................................................................................................1 5仪器与设备.....................................................................................................................................................2 6分析步骤.........................................................................................................................................................2 7结果判定.........................................................................................................................................................2 8结果确认.........................................................................................................................................................3 9性能指标.........................................................................................................................................................3 10其他...............................................................................................................................................................4 附录A（规范性附录）快速检测方法性能指标计算..................................................................................5 全国团体标准信息平台 II前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》 的规定起草。 本文件由全联农业产业商会提出。 本文件起草单位：全联农业产业商会、北京勤邦生物技术有限公司、北京三元食品股份 有限公司。 本文件主要起草人：郭树、万宇平、王兆芹、王春花、吴小胜、刘继超、董硕。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 1生乳中啶虫脒的快速检测胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了生乳中啶虫脒的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于生乳中啶虫脒的快速测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 食药监办科[2017]43号食品快速检测方法评价技术规范 3原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的啶虫脒经提取后与胶体金标记的特异性抗 体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的 变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中啶虫脒进行定性判定。 4试剂与材料 4.1试剂 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682中二级水的要求。 4.1.1甲醇（CH3OH）。 4.1.2参考物质：啶虫脒参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分 子质量见表1，纯度≥98%。 表1啶虫脒参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 啶虫脒 Acetamiprid 160430-64-8 C10H11ClN4 222.68 注：或等同可溯源物质。 4.2溶液配制 4.2.1啶虫脒标准储备液（100μg/mL）：准确称取啶虫脒参考物质（4.1.2）1mg，置于 10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的啶虫 脒标准储备液。4℃避光保存，有效期6个月。 全国团体标准信息平台 24.2.2啶虫脒标准工作液（1μg/mL）：精密移取啶虫脒标准储备液（100μg/mL）（4.2.1） 0.1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1μg/mL的 啶虫脒标准工作液。临用新配。 4.3材料 啶虫脒胶体金免疫层析试纸条，适用基质为生乳。需在阴凉、干燥、避光条件下保存。 4.3.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。 4.3.2试纸条。 5仪器与设备 5.1电子天平：感量为0.01g。 5.2移液器：10μL~200μL、100μL~1000μL。 5.3迷你金属浴。 6分析步骤 6.1试样制备 取适量有代表性样品充分混匀。 6.2试样提取 以生乳为基质的样品可直接上样检测或根据产品说明书稀释后检测。 6.3测定步骤 吸取200μL样品待测液于金标微孔（4.3.1）中，抽吸5~10次使混合均匀，35℃温育5min， 将检测试纸条（4.3.2）样品端垂直向下插入金标微孔中，35℃温育5min，取出试纸条，对 结果进行判定。 注1：测定步骤建议按照试纸条说明书。 注2：结果判定建议使用读数仪，读数仪的具体使用参照仪器使用说明书。 6.4质控试验 每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。 6.4.1空白试验 称取空白试样，按照6.2和6.3步骤与样品同法操作。 6.4.2加标质控试验 准确移取空白试样10mL放入离心管中，加入0.1mL啶虫脒标准工作液（1μg/mL）（4.2.2）， 使试样中啶虫脒浓度为10μg/L，按照6.2和6.3步骤与样品同法操作。 7结果判定 全国团体标准信息平台 37.1读数仪测定 按读数仪说明书要求操作，直接读数并进行结果判定。 7.2目视判定 通过对比质控线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。目视判定示意图 见图1。 7.2.1无效 质控线（C线）不显色，无论检测线（T线）是否显色，表明操作不正确或试纸条已失 效，检测结果无效。 7.2.2阳性结果 质控线（C线）显色，检测线（T线）不显色或颜色浅于质控线（C线），表明样品中啶 虫脒含量高于方法检出限，判定为阳性。 7.2.3阴性结果 质控线（C线）显色，检测线（T线）颜色深于质控线（C线）或与质控线（C线）颜色 基本一致，表明样品中啶虫脒含量低于方法检出限，判定为阴性。 图1目视判定示意图 7.3质控试验要求 空白试验测定结果应为阴性，